科研用检测试剂有效性存在一定不确定性 其主要原因受抗体影响

 导读：科研用检测试剂有效性存在一定不确定性   其主要原因受抗体影响。尽管科研用检测试剂是生物实验室基本实验测量手段，但在生物实验领域受科研用检测试剂本身生物特性的影响，可能导致实验结论出现偏差。

参考《2016-2022年中国体外诊断试剂行业发展态势及十三五盈利战略分析报告》

        尽管科研用检测试剂是生物实验室基本实验测量手段，但在生物实验领域受科研用检测试剂本身生物特性的影响，可能导致实验结论出现偏差。根据《自然》杂志（NATURE）报道，超过 70%的研究人员无法复制其他科学家的实验结论，超过 50%的研究人员无法复制自己的实验结果生物实验结果的影响因素很多，是否能够取得实验人员预设的结果以及该结果是否能够复现往往受实验样本活性、实验操作方式、实验环境因素等方面影响，这其中检测试剂检测结果的有效性和稳定性同样关键。尽管相关检测试剂厂商努力通过严格控制控制研发、生产过程，提升产品设计能力，提升产品检测手段，给用户提供相关详尽数据等方法提升其有效性，但仍无法完全保证使用其产品的检测结果在各种场合下均能保持稳定。

        科研用检测试剂的有效性主要受如下因素影响：

        （1）抗体特异性问题

        检测试剂的工作原理是利用抗体与特定蛋白或其他抗原结合，实现对标的蛋白或抗原的检测。特异性正常的抗体一般只能结合一种蛋白。抗体能否精确的结合抗原是检测成功的关键。若抗体能够结合其他非目标蛋白，则其特异性下降，有可能导致检测结果发生偏差。

        由于抗体结构和生产过程复杂，生产过程涉及生物特性难以精密控制，因此造成检测试剂中抗体的性能存在一定的差异。此外，检测样本中可能存在与检测目标蛋白类似的蛋白，容易对检测结果造成干扰。2011 年，美国研究人员对超过 200 种抗体进行了测试，其中25%的抗体产品会结合除目标蛋白以外的蛋白，特异性存在问题。

        （2）抗体的使用方式问题

        科研用检测试剂使用方式包括 ELISA ，WB， IHC，IF 等。 一种检测试剂无法在所有种类的实验中生效。主要原因是在不同的实验条件下，目标蛋白变性，导致折叠方式不同。抗体结合蛋白的点位结构有可能随之变化，导致抗体的结合能力发生改变。厂商通常会详细说明检测试剂的详细用法，但科研人员有可能以不恰当方式使用检测试剂，得出错误结论。

        （3）抗体多态性问题

        抗体的生产过程决定了其多态性。多克隆抗体主要生产过程为：生产人员将作为抗原的蛋白注射进实验动物体内，引发动物的免疫反应，生产人员再从动物的血清中提取目标抗体。但哺乳动物都拥有十分复杂的免疫系统，对一种抗原反应后，产生的抗体不止一种。一只动物不同时间产生的抗体性质有区别。同类动物个体间的差异巨大，免疫后产生的抗体组合也会有差异。在多克隆血清中，能够特异性结合目标蛋白的抗体仅占 0.5%-5%。每次免疫过程，动物体内产生的抗体组合不相同，导致提取高纯度的目标抗体会产生一定的误差。

        单克隆抗体多态性较多克隆抗体小，但仍无法完全避免多态性问题。产生单克隆抗体的杂交瘤细胞若培养条件不当，可能停止生长，或者由于基因突变而失去抗体制造的能力。在此情况下须重新制造杂交瘤细胞来生产抗体，从而导致不同批次的单克隆抗体实验效果可能存在区别。

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